





外泌体分离提取方案。主要方案包括:
1、差速超1速离心法;
适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;
2、基于peg沉淀原理的试剂盒法;
适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;
3、超滤提取法;
适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。
外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、nta检测(粒径及浓度鉴定)、wb(分子标志物)。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了---检测,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,胞外囊泡zetaview服务,可当天到样当天出结果。

外泌体介导细胞间的信号交流,是目前外泌体研究中十分---的领域。外泌体中有丰富rna以及蛋白,其中rna的种类包括mirna,lncrna,mrna等[1]。大量文献---,这些rna在细胞间的相互交流中发挥着---的作用。如,外泌体中mirna可以调节下游细胞对---的敏感性。在研究中,作者培养脂肪组织巨噬细胞(atm),并收集培养基中富含mir-155的外泌体,作用于下游的脂肪细胞和肌细胞。mir-155可以结合argonaut蛋白,并募集下游的目标mrna,从而影响细胞对---的敏感性和对---的耐受性[2]。此外,外泌体中的lncrna可以调控下游细胞的转录水平[3],mrna、蛋白等可以通过外泌体转运至下游细胞,并在胞内进行翻译

外泌体(exosome)指包含了复杂rna和蛋白质的膜性囊泡,其直径在30-150nm左右。存在于所有生物---中,包括---、唾液、尿液、滑液、羊水、细胞培养液等。不论是正常细胞还是肿1瘤细胞,都能够产生外泌体。 外泌体富含胆固醇和鞘磷脂,具有脂质双分子层结构;此外,外泌体还含有蛋白质和---。不同细胞来源的外泌体中所含有的生物分子具有细胞种属特---,其外泌体特---与来源细胞相符合。

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