染色体原位杂交测试服务-科锐诺生物科技

tunel流式细胞凋亡检测服务通常称为细胞程序性死1亡，是由基因控制的主动性细胞死1亡过程。越来越多数据发现，细胞凋亡与多种---密切相关，如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力，利用流式细胞仪分析细胞凋亡可为肿1瘤诊断，疗1效评价和预后预测提供了重要的参考指标。

　　tunel（tdt-mediated dutp nick end labeling）细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核dna的断裂情况，其原理是生物素biotinylate标记的dutp在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（tdt enzyme）的作用下，可以连接到凋亡细胞中断裂dna的3’-oh末端，并与连接辣根---化酶（hrp，horse-radish peroxidase）的链霉亲和素streptavidin特---结合，后者又与pod底物h2o2、二氨1基联1---1胺（dab）产生深棕色反应，特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在光学显微镜下即---察凋亡细胞；由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有dna断裂，因而没有3‘-oh形成，很少能够被染色。本试剂盒适用于组织样本（石蜡包埋、冰冻和超薄切片）和细胞样本（细胞涂片）在单细胞水平上的凋亡原位检测。还可应用于抗肿1瘤药的药1效评价，以及通过双色法确定细胞类型和分化阶段。

杂交结束后，去除杂交液，立即于室温把滤膜放入大体积（300-500ml）的2×ssc和0.1% sds溶液中，轻轻振摇5分钟，并将滤膜至少翻转一次。重复洗 一次，同时应避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×ssc和0.1% sds溶液洗膜两次，每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景---或实验要求严格的洗膜条件，可用300-500ml 0.2×ssc和0.1% sds的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。

把滤膜放在纸巾上于室温晾干后，把滤膜（编号面朝上）放在一张保鲜膜上，并在保鲜膜上作几个不对称的标记，以使滤膜与性自显影片位置对应。

用第二张保鲜膜盖住滤膜。加x片并加上增感屏于-70℃---12-16小时。

底片显---，在底片上贴一张透明硬纸片。在纸上标记阳性杂交信号的位置，同时在不对称分布点的位置上作出标记。可从底片上取下透明纸，通过对比纸上的点与琼脂上的点来鉴定阳性菌落。