





常见的生物切片一般有三种,徒手切片、石蜡切片、火棉胶切片三种。徒手切片法简单省时间,容易掌握,虽有局限性,石蜡切片法所使用的支持剂是石蜡,优点是切下的片子薄而匀,还能作连续切片,但制作手续较复杂,具体可分为固定、冲洗、脱水、染色、浸蜡、切片、透明和封藏八步进行操作。火棉胶切片法所使用的支持剂是火棉胶。这种方法的优点是包埋过程不经高温,可以避免组织收缩及变脆,适用精细材料(如脑)的切片,适于大块组织及多空洞的组织(如脑、眼球)的切片。

石蜡切片制作流程1.取材:取材必须新鲜,切取材料时刀要锐利避免挤压组织,一般厚度不超过2mm,大小不超过5×5mm2,取后立即投入固定液。
2.固定:固定剂为组织块体积的10~15倍,一般为4%的中性---,固定时长24小时。
3.脱水:70%酒精***85%酒精***90%酒精***95%酒精***无水---ⅰ***无水---ⅱ(不同组织脱水时间不同)
4.透明:透明剂能同时与脱水剂和石蜡混合,它取代了脱水剂后,石蜡便能顺利地渗入组织

常见的生物切片,厚度一般在几微米的程度,这种厚度制作起来比较简单,植物木质部切片服务,除了可以使用自动化的设备来切片之外,手动操作也能切到这种厚度,而且完够满足光学显微镜下观察的标准。不过在的科研领域里,需要观察更细微的细胞结构,甚至需要从分子的层面来进行研究,这时候就需要用到电子显微镜。然而电子显微镜也需要更薄的样品,切片至少要达到0.1微米的厚度,而这种切片也就被称为是超薄切片,在很多实验研究里需要厚度达到50纳米,显然手i操作是无法达到这种厚度的。那么在实验环境下是怎样做成这种超薄生物切片的呢?首先是需要进行---的固定,因为在如此薄的尺度之下,不但基本的细胞结构都已经被完全破坏,而且其中的细胞器也都被切开,里面的生物酶会释放出来,并且在很短的时间内使细胞结构遭到破坏。所以就需要在取得样品之后尽快进行固定,要求在一-分钟之 内完成这项操作,然后再使用对应的材料来做透明化以及包埋,接下来还需要配合的切片机来完成切片的过程,从而达到理想的厚度。

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