





在透射电镜基础上,用外泌体标记蛋白对外泌体进行免1疫标记,利用胶体金标记出外泌体表面的特定抗原的位置。结合透射电镜形态学定性的特点,同时确定外泌体标记蛋白的位置。这样同时从形态学及免1疫学原理上验证外泌体。这样数据结果中既可以获得---形态的外泌体,又可以定性及定位外泌体表面的标志蛋白。这样具有更充分的说服力。

外泌体装载着各种免1疫相关分子,通过这些分子来调节免1疫应答。例如,在细胞---性t细胞或者自然---性细胞来源的外泌体上,携带fas配体、trail、cd40配体等tnf家族蛋白,可---靶1细胞凋亡。
有---称,癌细胞中也可以释放装载着fas配体或trail等的外泌体,---免1疫细胞凋亡,使癌细胞免受免1疫细胞的攻击。一般情况下,tnf家族蛋白以膜结合形式产生,被膜型金属蛋白酶切割后转变为可溶性蛋白。膜结合蛋白主要担负---细胞凋亡的功能,但可溶性蛋白的活性较弱。

外泌体的组成:外泌体主要含有融合蛋白和转运蛋白、热休1克蛋白(hsp 70)、cd类蛋白以及磷脂酶和其他脂质相关蛋白,但是不同来源的外泌体的组成有差异。
外泌体的提取方式:
1、离心法:此种方法得到的外泌体量多,但是纯度不足。
2、过滤离心:这种操作简单、省时,外泌体测序检测,不影响外泌体的生物活性,但同样纯度不足。
3、密度梯度离心法:用此种方法分离到的外泌体纯度较高,但是前期准备工作繁杂
4、免1疫磁珠法:这种方法可以---外泌体形态的完整,特---高、操作简单,但生理性盐浓度会影响外泌体生物活性。
5、色谱法:此种方法分离出的外泌体大小均一,但设备特殊,应用不广泛。
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