





目前,我国已稳定开展的分子病理技术主要有显色原位杂交、荧光原位杂交、pcr、荧光定量pcr、基因芯片和dna测序技术dna原位杂交主要用于基因定位、特异基因(如病原微生物基因)检测等;rna原位杂交则用于基因表达检测。原位杂交技术的优点是操作简单,可直接定位组织,价格低廉,信号稳定,储存方便,可做组织学评价,是目前应用较多的分子病理技术之一。

fish是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,该方法在80年代末 被发明,现已从实验室逐步进入---诊断领域。基本原理是荧光标记的---探针在变性后与已变性的靶---在退火 温度下复性;通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶---进行分析。dna荧光标记探针是其中常用的一类---探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的dna进行染色体及基因水平 的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,可进行多色观察分析,因而可同时使用多个探针,缩 短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。

后固定:胃蛋白酶---后才需要。固定液为1%---/0.1 m pbs(ph7.2-7.6),含有1/1000 depc。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
原位杂交的预杂交:湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体,植物根尖原位杂交技术服务,不洗。
杂交——按每张切片20μι杂交液,加在切片上。将原位杂交专1用盖玻片的保护膜揭开后,盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
杂交后洗涤:揭掉盖玻片,37℃左右水温的2×ssc洗涤5分钟×2次;37℃0.5×ssc洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×ssc洗涤15分钟×1次(如果有非特---染色,重复0.2×ssc洗涤15分钟×1-2次)。
植物根尖原位杂交技术服务-科锐诺(图)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司位于湖北省武汉市江夏区神墩四路666号武汉国英种子a栋1楼。在市场经济的浪潮中拼博和发展,目前科锐诺在技术合作中享有---的声誉。科锐诺取得---商盟,标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。科锐诺全体员工愿与各界有识之士共同发展,共创美好未来。
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