





原位杂交的应用范围:
细胞特---mrna转录的定位,可用于基因图谱,基因表达和基因组进化的研究;
感1染组织中---dna/rna的检测和定位,如eb---mrna、人类乳1头状瘤1---和巨细胞---dna的检测;
癌基因、抑癌基因及各种功能基因在转录水平的表达及其变化的检测;
基因在染色体上的定位;
检测染色体的变化,如染色体数量异常和染色体易位等;
分裂间期细胞遗传学的研究,如遗传病的产前诊断和某些遗传病基因携带者的确定,某些肿1瘤的诊断和生物学剂量测定等。

1,组化
实验原理:组化(ihc),是应用抗原与特---结合的原理,通过酶标与底物反应显色,从而对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究,称为组织化学技术。组化(ihc)具有特---强、敏感度高、定位准确的优点。
1, 荧光
实验原理:荧光(if),是应用抗原与特---结合的原理,通过荧光标记对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究。目前皮诺飞生物主要可以对石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、组织芯片进行荧光检测。皮诺飞生物目前已突破传统的荧光双标---,开发出多色荧光技术(多可达7色)。
原位杂交第三天
1) 用1ml含10%热灭清的mabt溶液置换溶液,放置摇床上25分钟,然后用1mlmabt置换,25分钟,再用1mlmabt溶液置换,一小时以上,后用1mlmabt溶液置换,25分钟。
2) 用1ml 1mm左旋米睉的staining buffer洗三次,每次放置五分钟。
3)将胚胎转入十六孔板中,吸去staining buffer,加上300ul bm purple ap substrate(底物,用之前加5mm左旋米唑),十六孔板外面包上锡箔纸以避光,避免摇动,植物叶片原位杂交技术服务,室温下显色。
4)每隔一小时观察胚胎是否开始显色
5)将显色完全的胚胎中的底物吸出,用pbst洗两三次后加上4%---固定,拍照。
6)4c冰箱保存。
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