后固定：胃蛋白酶---后才需要。固定液为1%---/0.1 m pbs（ph7.2-7.6），含有1/1000 depc。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。
原位杂交的预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。
杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专1用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。
杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×ssc洗涤5分钟×2次；37℃0.5×ssc洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×ssc洗涤15分钟×1次(如果有非特---染色，重复0.2×ssc洗涤15分钟×1-2次)。
分子病理应用的检测样本主要包括石蜡组织、新鲜组织、脱落细胞、全血及其他---等。石蜡切片标本厚度应在4-6μm，切片数量依据组织大小而定。样本对检测结果和分析---，病理---需要对可评估的样本进一步明确病理诊断，并评价标本有无出血、坏死和不利于---的前处理(例如含hcl脱钙液处理)，病变细胞(如细胞)的总量和比例，避免假阴性。进行ngs检测前需通过病理诊断明确其的性质及含量，根据不同类型选择合适的基因panel测序。组织标本中细胞含量建议达到20%以上，低于此标准可富集后检测。未经病理评估的---结果不可单独用于分子病理---诊断目的。
原位杂交（in situ hybridization）将标记的---探针与细胞或组织中的---进行杂交，分子病理技术服务，称为原位杂交，使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。
原位杂交技术的基本原理是利用---分子单链之间有互补的碱基序列，将有放1射性或非放1射性的外源---(即探针)与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对，结合成专一的---杂交分子，经一定的检测手段将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的---序列必须具备3个重要条件：组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物
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