武汉科锐诺-植物染色体原位杂交测试服务

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    2024-7-10

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  荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,fish)技术基本原理与显色原位杂交相同,不同之处在于fish是应用荧光素标记的探针与组织细胞中待测---反应形成杂交体,并采用荧光显微镜或激光共---显微镜观察信号表达。为了同时检测多个靶位,在荧光原位杂交技术的基础上发展起来一种新技术,即多彩色荧光原位杂交




杂交结束后,去除杂交液,立即于室温把滤膜放入大体积(300-500ml)的2×ssc和0.1% sds溶液中,轻轻振摇5分钟,并将滤膜至少翻转一次。重复洗 一次,同时应避免膜干涸。

68℃用300-500ml 1×ssc和0.1% sds溶液洗膜两次,每次1-1.5小时。此时已可进行自显影。如背景---或实验要求严格的洗膜条件,可用300-500ml 0.2×ssc和0.1% sds的溶液于68℃将滤膜浸泡60分钟。

把滤膜放在纸巾上于室温晾干后,植物染色体原位杂交测试服务,把滤膜(编号面朝上)放在一张保鲜膜上,并在保鲜膜上作几个不对称的标记,以使滤膜与性自显影片位置对应。

用第二张保鲜膜盖住滤膜。加x片并加上增感屏于-70℃---12-16小时。

底片显---,在底片上贴一张透明硬纸片。在纸上标记阳性杂交信号的位置,同时在不对称分布点的位置上作出标记。可从底片上取下透明纸,通过对比纸上的点与琼脂上的点来鉴定阳性菌落。








荧光定量pcr(realtimepcr)技术是近几年基于普通pcr技术发展的一种新技术。它借助荧光信号来检测pcr产物,通过荧光染料或荧光标记的特异探针,对pcr产物进行标记---,在扩增过程中,每经过一次循环,荧光定量pcr仪就会收集一次荧光信号,实时检测整个pcr进程。用荧光定量pcr法检测目的基因仅需检测样本是否具有扩增信号即可,且pcr反应具有---扩增的高1效性,可检测出微小突变。根据探针标记不同可分为taqman探针法和arms法。

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