





原位末端凋亡检测(tunel)
实验原理: tunel技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色,能准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性---内切酶被而将自身染色体dna切断成缺口或3-oh末端片段这一特点,利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如,生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-oh末端,再用组化法或荧光检测凋亡细胞。

意义
免yi组织化学的---应用主要包括以下几方面:
(1)的诊断与鉴别诊断;
(2)确定转移性的原发部位;
(3)对某类进行进一步的病理分型;
(4)软组织的一般需根据正确的组织学分类,因其种类多、组织形态相像,有时难以区分其组织来源,应用多种标志进行组化研究对软组织的诊断是不可缺少的;
(5)发现微小转移灶,有助于---方案的确定,包括手术范围的确定。
(6)为---提供方案的选择。
应用于分子病理诊断的dna测序技术有直接测序法和焦磷酸测序法。直接测序技术主要是sanger等发明的双脱氧链末端终止法。其原理就是根据核苷酸在某一固定的点开始,花芽原位杂交技术服务,随机在某一个特定的碱基处终止,产生a、t、c、g4组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的page胶上电泳进行检测,从而获得dna序列。直接测序法是基因突变检测的“金标准”,其优点是结果准确,重复性好,可检测整个测序范围内已知和未知突变点;缺点是步骤多,耗时长,灵敏度低,过程不易控制,在检测已知突变位点方面将逐渐被荧光定量pcr法替代。

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