胞外囊泡透射电镜技术服务-武汉科锐诺

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    2024-7-31

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外泌体分离提取方案。主要方案包括:

1、差速超1速离心法;

适用于细胞上清、灌洗液、尿液等大体积的样品;

2、基于peg沉淀原理的试剂盒法;

适用于血1清、脑脊液等小体积的样品;

3、超滤提取法;

适用于---培养液或外泌体含量较低的样品浓缩。亦可搭配超1速离心法,做进一步的提取。


外泌体是细胞外囊泡的一种,其膜来源与粒径范围与细胞外囊泡相似,电镜下,显示出典型的茶托状超微结构。实际操作中,通过常规的单一的方法很难鉴定外泌体。鉴定外泌体需要包含形态、粒径、表面分子标记物等多方面的鉴定。具体方法包括:透射电镜(形态鉴定)、nta检测(粒径及浓度鉴定)、wb(分子标志物)。nta检测作为外泌体鉴定的---方法之一,可同时反映出检测样品的浓度及粒径。较好,纯度较高的外泌体样品,粒径分布在30-150nm,原液浓度在10^9左右。为了---检测,对每一个样品,都会进行3次技术重复。检测周期为2-3个工作日,可当天到样当天出结果。








自噬是一个吞噬自身细胞质蛋白或细胞器并使其包被进入囊泡,胞外囊泡透射电镜技术服务,并与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其所包裹的内容物的过程,借此实现细胞本身的代谢需要和某些细胞器的更新。自噬体,其直径一般为 300 ~ 900 nm,平均 500 nm,囊泡内常见的包含物有胞质成分和某些细胞器如线粒体、内吞体、---化物酶体等。与其他细胞器相比,自噬体的半衰期很短,只有 8 min 左右,说明自噬是细胞对于环境变化的有效反应。





抗原提呈中外泌体的作用

树突状细胞是免1疫系统中分泌外泌体活跃的细胞。树突状细胞是抗原提呈细胞的一种,能通过吞噬入1侵体内的---等异物,在切断抗原肽后,与 mhcⅱ类分子结合并提呈在细胞表面来激1活t细胞。细胞内的抗原肽利用mhcⅰ类分子提呈,树突状细胞分泌的外泌体携带mhcⅰ类和ⅱ类分子,它们分别与抗原特---cd8+ 细胞---性t细胞、cd4+ 辅助t细胞的t细胞受体结合,在远离树突状细胞处也可以激1活t细胞。




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