结1核病是---威胁人类健康的传1染性---，每年约有200万人死于该病，其死1亡率在传1染性---中仅低于艾1滋病，随着医1疗诊断技术的迅猛发展，结1核病病理诊断经历了单一形态学和联合特殊染色，到如今利用分子病理---技术进行准---断的三个阶段。
我科早在全1国建立了系统性结1核病分子病理诊断技术的平台，植物染色体原位杂交技术服务，率1先将分子病理诊断技术在结1核病中应用并推广，解决了传统病理对菌阴肺结1核及肺外结1核病的诊断率低、结1核病与非结1核分枝杆1菌病无法鉴别以及耐药结1核病无法诊断等难题。同时，我科作为中华医学会结1核病学分会金1牌病理培训基地，负责组织制定了结1核病病理诊断规范、培训了大量的专1业---，为形成结1核病病理学综合诊治新模式做出了卓1越贡献!
应用于分子病理诊断的dna测序技术有直接测序法和焦磷酸测序法。直接测序技术主要是sanger等发明的双脱氧链末端终止法。其原理就是根据核苷酸在某一固定的点开始，随机在某一个特定的碱基处终止，产生a、t、c、g4组不同长度的一系列核苷酸，然后在尿素变性的page胶上电泳进行检测，从而获得dna序列。直接测序法是基因突变检测的“金标准”，其优点是结果准确，重复性好，可检测整个测序范围内已知和未知突变点;缺点是步骤多，耗时长，灵敏度低，过程不易控制，在检测已知突变位点方面将逐渐被荧光定量pcｒ法替代。
菌落的裂解及dna结合于纤维素滤膜
（1） 在一张保鲜膜上制作一个装有0.5mol/l naoh的小洼（0.75ml），使菌落面朝上，将滤膜放到小洼上，展平保鲜膜，使滤膜均匀湿润，让滤膜留于原处2-3分钟。
（2） 用干纸巾从滤膜的下方吸干滤膜，用一张新的保鲜膜和新配制的0.5mol/l naoh重复步骤（1）。
（3） 吸干滤膜，将滤膜转移到新的带有1mol/l tris·cl(ph7.4）的保鲜膜洼上。5分钟后吸干滤膜，再重复一次该步骤。
（4） 吸干滤膜，把它转移到有1.5mol/l nacl、0.5mol/l tris·cl (ph7.4）的保鲜膜小洼上5分钟后吸干滤膜，转移到一张干的滤纸上，置于室温20-30分钟，使滤膜干燥。
（5） 将滤膜夹在两张干的滤纸之间，在真空烤箱中于80℃干烤2小时，固定dna。
（6） 将固定在膜上的dna与32 p标记的rna进行杂交。
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