阻断内源性---化物酶：滴加3%1甲1醇-h2o2，室温避光孵育15min，将玻片置于pbs（ph7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
预杂交：滴加预杂交液，37°c孵育1h。
杂交：倾去预杂交液，滴加含探针has-circ-st6galnac6 probe 杂交液，浓度6ng/ul，恒温箱37度杂交过夜。
杂交后洗涤：洗去杂交液，2×ssc，37°c 洗10min，1×ssc，37°c洗2×5min，0.5×ssc室温洗10min。若非特异杂交体较多，可以增加---胺洗涤。
滴加封闭液：滴加封闭血1清（正常兔血1清），室温30min。
滴加鼠抗地1高辛标记---化物酶（anti-dig-hrp）：倾去封闭液，滴加anti-dig-hrp。37°c孵育50min，后pbs洗3次×5min。
原位杂交天
1. 重新水化和固定
1） 吸取固定好的胚胎，植物组织原位杂交测试服务，加入50%的pbst溶液，放置5分钟。
2） 置换成30%的pbst溶液，放置5分钟
3） 置换成pbst溶液，放置5分钟，重复一次
4） 置换成4%---的pbs溶液固定20分钟5） 用pbst洗两次，每次放置五分钟，室温。
蛋白酶处理与后固定（本实验不做此步）
1） 用10ul/ml的蛋白酶k在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理，5体节到24小时的胚胎处理3分钟，24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶处理，发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织，以便于杂交。
2） 用pbst溶液轻洗，在pbst中放置5分钟。
3） 用4%---的pbs溶液固定20分钟，室温。
4） 用pbst洗两次，每次放置五分钟，室温。
2. 预杂交
1）每个管中置换成大约300ulhyb－溶液，60℃水浴5分钟，避免振荡。
2）用等体积的hyb+取代hyb－。
3）60℃水浴，预杂交4小时以上。
3. 杂交
1）吸去预杂交的hyb+，加上100ul已加入探针的hyb+溶液（探针浓度约为1ng/ul）..
2）60℃ 温浴过夜。注：杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等，温度越低，探针结合越好，温度越高，背景越小。
分子病理学是一门新兴学科，是在基因水平上用分子生物学技术研究---发生1发展的一个病理学分支学科。分子病理学进行的检测通常称之为---，即取检测者的肿1瘤组织、胸水或---等，经提取和扩增其基因信息后，通过相应的分子生物学技术，对被检测者细胞中的dna分子的基因信息进行检测，分析他的基因状态，从而对肿1瘤的诊断或治1疗提供一定的帮助。
植物组织原位杂交测试服务-科锐诺(商家)由武汉科锐诺生物科技有限公司提供。武汉科锐诺生物科技有限公司是一家从事“外泌体,透射电镜,扫描电镜,石蜡切片等技术服务”的公司。自成立以来，我们坚持以“诚信为本，---经营”的方针，勇于参与市场的良性竞争，使“科锐诺”品牌拥有------。我们坚持“服务，用户”的原则，使科锐诺在技术合作中赢得了客户的---，树立了---的企业形象。 ---说明：本信息的图片和资料仅供参考，欢迎联系我们索取准确的资料，谢谢！
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