分子病理技术服务-武汉科锐诺生物

分子病理检测的意义

　　 精1准医学时代的分子l靶向---

　　精1准医学概念的提出使各医学学科在---方式、治1疗手段上都发生着翻天覆地的变化，但精1准的治1疗首先必须依托于精1准的诊断，基因状态检测则是精1准诊断的#步。---可以诊断---，也可以用于---风险的预测及指导肿1瘤靶向药1物治1疗。---是通过组织、---、---或细胞对dna进行检测的技术，取被检测者组织细胞，扩增其基因信息后，通过特定设备对被检测者细胞中的dna分子信息作检测，预知身体患---的风险，分析它所含有的各种基因情况，从而使人们能了解自己的基因信息。

原位杂交天

1. 重新水化和固定

1） 吸取固定好的胚胎，加入50%的pbst溶液，放置5分钟。

2） 置换成30%的pbst溶液，放置5分钟

3） 置换成pbst溶液，放置5分钟，重复一次

4） 置换成4%---的pbs溶液固定20分钟5） 用pbst洗两次，每次放置五分钟，室温。

蛋白酶处理与后固定（本实验不做此步）

1） 用10ul/ml的蛋白酶k在室温下处理胚胎。5体节以下的胚胎不处理，5体节到24小时的胚胎处理3分钟，24小时以上的胚胎处理5分钟或者更长。发育时间越短的胚胎越嫩，可以不用或者少用蛋白酶处理，发育时间长的胚胎就需要用蛋白酶来疏松组织，以便于杂交。

2） 用pbst溶液轻洗，在pbst中放置5分钟。

3） 用4%---的pbs溶液固定20分钟，室温。

4） 用pbst洗两次，每次放置五分钟，室温。

2. 预杂交

1）每个管中置换成大约300ulhyb－溶液，分子病理技术服务，60℃水浴5分钟，避免振荡。

2）用等体积的hyb+取代hyb－。

3）60℃水浴，预杂交4小时以上。

3. 杂交

1）吸去预杂交的hyb+，加上100ul已加入探针的hyb+溶液（探针浓度约为1ng/ul）..

2）60℃ 温浴过夜。注：杂交与预杂交的温度可以是55到60度不等，温度越低，探针结合越好，温度越高，背景越小。