科锐诺生物-原位杂交技术服务

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    2023-10-13

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多彩色荧光原位杂交(multicolorfluorescenceinsituhybridization,mfish)。它用几种不同颜色的荧光素单独或者混合标记的探针进行原位杂交,能同时检测多个基因,原位杂交技术服务,扩大了fish技术的---应用。fish技术目前主要应用于染色体和dna水平上的病理诊断检测。染色体fish主要检测染色体易位、缺失、重复、变异等;dnafish主要是检测基因突变、扩增、易位、缺失。与原位杂交技术相比,fish安全、快速,特---好、定位准确。





滴加fitc-tsa:滴加fitc-tsa试剂,避光室温反应5min。后tbst洗3次×10min,pbs洗1次×5min。

dapi复染核:切片滴加dapi染液,避光孵育8min,冲洗后滴加抗荧光淬灭封片1剂封片。

镜检拍照:切片于尼康正置荧光显微镜下观察并采集图像。(紫外激发波长330-380nm,发射波长420nm,发蓝光;fam(488)绿光激发波长465-495nm,发射波长515-555 nm,发绿光;cy3红光激发波长510-560,发射波长590nm,发红光。)





fish是原位杂交技术大家族中的一员,因其所用探针被荧光物质标记(间接或直接)而得名,该方法在80年代末 被发明,现已从实验室逐步进入---诊断领域。基本原理是荧光标记的---探针在变性后与已变性的靶---在退火 温度下复性;通过荧光显微镜观察荧光信号可在不改变被分析对象(即维持其原位)的前提下对靶---进行分析。dna荧光标记探针是其中常用的一类---探针。利用此探针可对组织、细胞或染色体中的dna进行染色体及基因水平 的分析。荧光标记探针不对环境构成污染,灵敏度能得到保障,可进行多色观察分析,因而可同时使用多个探针,缩 短因单个探针分开使用导致的周期过程和技术障碍。




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