植物基因组原位杂交检测服务-武汉科锐诺生物

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    2023-10-18

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  荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,fish)技术基本原理与显色原位杂交相同,不同之处在于fish是应用荧光素标记的探针与组织细胞中待测---反应形成杂交体,并采用荧光显微镜或激光共---显微镜观察信号表达。为了同时检测多个靶位,在荧光原位杂交技术的基础上发展起来一种新技术,即多彩色荧光原位杂交




原位杂交(in situ hybridization)将标记的---探针与细胞或组织中的---进行杂交,称为原位杂交。使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。rna原位---杂交又称rna原位杂交组织化学或rna原位杂交。该技术是指运用crna或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内rna表达的一种原位杂交技术。其基本原理是:在细胞或组织结构保持不变的条件下,植物基因组原位杂交检测服务,用标记的已知的rna核苷酸片段,按---杂交中碱基配对原则,与待测细胞或组织中相应的基因片段相结合(杂交),所形成的杂交体 (hybrids)经显色反应后在光学显微镜或电子显微镜下观察其细胞内相应的mrna、rrna和trna分子。rna原位杂交技术 经不断改进,其应用的领域已---出dna原位杂交技术。尤其在基因分析和诊断方面能作定性、定位和定量分析,已 成为有效的分子病理学技术,同时在分析低丰度和罕见的mrna表达方面已展示了分子生物学的一重要方向。





1、组织取材:组织取材应尽可能新鲜。由于组织rna降解较快,所以新鲜组织和培养细胞在30 min 内固定。

       2、细胞组织固定目的与注意事项:

       (1)保持细胞结构;

       (2)大限度地保持细胞内dna或rna的水平;

       (3)使探针易于进入细胞或组织。

        常用的固定剂是---,与其它醛类固定剂不同,---不会与蛋白质产生广泛的交叉连接,因而不会影响探针穿透入细胞或组织。







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