





将少数菌落转移到纤维素滤膜上
(1) 在含有选择性的琼脂平板上放一张纤维素滤膜。
(2) 用无菌---将各个菌落先转移至滤膜上,再转移至含有选择性但未放滤膜的琼脂主平板上。应按一定的格子进行划线接种(或打点)。每菌落应分别划线于两个平板的相同位置上。后,在滤膜和主平板上同时划一个含有非重组质粒的菌落。
(3) 倒置平板,于37℃培养至划线的---菌落生长到0.5-1.0mm的宽度。
(4) 用已装防水黑色绘图墨水的针头穿透滤膜直至琼脂,在3个以上的不对称位置作标记。在主平板大致相同的位置上也作上标记。
(5) 用parafilm膜封好主平板,倒置贮放于4℃,直至获得杂交反应的结果。
(6) 裂解---,按本段下面所述方法,使释放的dna结合于纤维素滤膜。
原位末端凋亡检测(tunel)
实验原理: tunel技术可对组织或细胞中凋亡小体或单个凋亡细胞进行染色,能准确反映细胞凋亡典型的生物化学和形态特征。凋亡细胞内内源性---内切酶被而将自身染色体dna切断成缺口或3-oh末端片段这一特点,利用脱氧核苷酸末端转移酶将标有标记物(如,生物素或荧光素)的脱氧核苷酸转移到3-oh末端,水稻原位杂交检测服务,再用组化法或荧光检测凋亡细胞。

分子病理学诊断主要应用于以下几个方面:1、对于肿l瘤---的检测,对于肿l瘤高危人群的筛检具有实用价值,如检测gstπ基因以判定个体暴露于---物是的---危险性。2、肿l瘤相关---的检测,如采用原位杂交方法检测标本中hpv、eber等---。3、疑难肿l瘤的诊断和分类,尤其在鉴别诊断淋巴细胞增l生性---与淋巴细胞性肿l瘤上有着---的特---和---性。4、肿l瘤的个体化治l疗,能够根据肿l瘤发生l发展不同阶段分子水平的特点,对肿l瘤的个体化和预见性治l疗具有指导意义。5、肿l瘤的预后判断,如采用荧光原位杂交技术(fish)检测her-2基因在乳l腺l癌---中的表达情况,配合术后治l疗,指导---用药选择。

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