科锐诺生物-分子病理技术服务

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    2023-11-27

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原位杂交(in situ hybridization)将标记的---探针与细胞或组织中的---进行杂交,称为原位杂交,使用dna或者rna探针来检测与其互补的另一条链在---或其他真核细胞中的位置。

       原位杂交技术的基本原理是利用---分子单链之间有互补的碱基序列,将有放1射性或非放1射性的外源---(即探针)与组织、细胞或染色体上待测dna或rna互补配对,结合成专一的---杂交分子,经一定的检测手段将待测---在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。为显示特定的---序列必须具备3个重要条件:组织、细胞或染色体的固定、具有能与特定片段互补的核苷酸序列(即探针)、有与探针结合的标记物

     



染色体发现距今已有150多年的历史,染色体检测被广泛用于动、植物及人类的细胞遗传学研究,随着染色体分技术和分子生物学技术的发展。染色体研究范围也不断扩大,---是用于肿1瘤分子诊断。肿1瘤细胞的染色体变化是一非常普遍的现象,可分为原发和继发两类。在肿1瘤形成的生物学基础方面,原发性的染色体变化与引起肿1瘤的直接原因有关,肿1瘤细胞中可以发现各种形式的染色体畸变,如缺失、重复、易位、重排、单体断裂及核内复1制等;继发性变化主要是肿1瘤细胞核型的改变。染色体的检测对于肿1瘤的诊断、鉴别诊断、生物学行为判别等方面都重要意义。染色体的检测方法进展很快,检测的精1确率也不断提高,




原位杂交杂交液注意事项:

       (1)杂交液内除含一定浓度的标记探针外,还含有较高浓度的盐类、---胺、---葡聚糖、牛血1清白蛋白及载体dna或rna等。

       (2)杂交液中含有较高浓度的na+可使杂交率增加,可以减低探针与组织标本之间的静电结合。---胺可使tm降低,杂交液中含每1%的---胺可分别使rna:rna,rna:dna,dna:dna的杂交温度降低0.35℃,分子病理技术服务,0.5℃和0.65℃。,所以杂交液中加入适量的---胺,可避免因杂交温度过高而引起的组织形态结构的破坏以及标本的脱落。---葡聚糖能与水结合,从而减少杂交液的有效容积,提高探针有效浓度,以达到提高杂交率的目的(尤其对双链---探针)。

       在杂交液中加入牛血1清白蛋白及载体dna或rna等,都是为了阻断探针与组织结构成分之间的非特---结合,以减低背景。






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