





应用于分子病理诊断的dna测序技术有直接测序法和焦磷酸测序法。直接测序技术主要是sanger等发明的双脱氧链末端终止法。其原理就是根据核苷酸在某一固定的点开始,随机在某一个特定的碱基处终止,产生a、t、c、g4组不同长度的一系列核苷酸,然后在尿素变性的page胶上电泳进行检测,从而获得dna序列。直接测序法是基因突变检测的“金标准”,其优点是结果准确,分子病理技术服务,重复性好,可检测整个测序范围内已知和未知突变点;缺点是步骤多,耗时长,灵敏度低,过程不易控制,在检测已知突变位点方面将逐渐被荧光定量pcr法替代。

分子病理检测的意义:
通过分子检测协助病理诊断
某些肿1瘤具有特定的分子病理学改变,对于病理常规染色难于诊断的这些肿1瘤,进行分子病理检测可协助得出准确的病理诊断。例如淋巴1瘤的鉴别诊断往往依赖于形态和免1疫组化的综合判断,但有些时候,这些手段也不能满足诊断的需要,这时我们通过ig或tcr基因重排检测,可协助鉴别淋巴细胞的普通增殖和肿1瘤性增殖。
原位杂交试验
收集斑马鱼的胚胎,在holfretor水中培养,到达所需要的发育时期时,用蛋白酶去除卵膜,用4%---固定,在4℃保存,二十四小时后用50%2%---溶液洗,然后换成,在-20c 保存,待用(两天和两天以上的胚胎需要用处理,去除色素。或者使用---锍脲稀溶液培养,可阻断色素的形成) 武汉科锐诺生物科技有限公司

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