植物染色体原位杂交检测服务-科锐诺

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    2024-7-12

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癌组织原位杂交实验步骤:

       1. 将准备做原位杂交的样本常规脱水、浸蜡、包埋。切片厚度6-8μm。

       2. 玻片的处理:一般采用多聚赖氨酸或apes。

       3. 石蜡切片经常规脱蜡至水。30%h2o2 1份+蒸馏水10份混合,室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。

       4. 暴露mrna---片段:切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释的胃蛋白酶(1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型胃蛋白酶,混匀),37℃或室温---3--30分钟(视标本新旧、厚薄自行调整)。原位杂交用pbs洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。







意义

在研究dna分子原理的基础上发展起来的一种技术。其基本原理是两条核苷酸单链片段,在适宜的条件下,能过氢键结合,形成dna-dna、dna-rna或 rna-rna 双键分子的特点,应用带有标记的(有性同位素,如3h、35s、32p、荧光素生物素、等非性物质)dna或rn---段作为---探针,与组织切片或细胞内待测---(rna或dna)片段进行杂交,然后可用自显影等方法予以显示,在光镜或电镜下观察目的 mrna或dna 的存在并定位;用原位杂交技术,可在原位研究细胞合成某种多肽或蛋白质的基因表达。此方法有---的敏感性和特---,可进一步从分子水平来探讨细胞的功能表达及其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。




tunel流式细胞凋亡检测服务通常称为细胞程序性死1亡,是由基因控制的主动性细胞死1亡过程。越来越多数据发现,细胞凋亡与多种---密切相关,如癌细胞具有连续增殖、抵抗细胞凋亡能力,利用流式细胞仪分析细胞凋亡可为肿1瘤诊断,疗1效评价和预后预测提供了重要的参考指标。

  tunel(tdt-mediated dutp nick end labeling)细胞凋亡检测试剂盒是用来检测组织细胞在凋亡早期过程中细胞核dna的断裂情况,其原理是生物素biotinylate标记的dutp在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(tdt enzyme)的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂dna的3’-oh末端,并与连接辣根---化酶(hrp,horse-radish peroxidase)的链霉亲和素streptavidin特---结合,后者又与pod底物h2o2、二氨1基联1---1胺(dab)产生深棕色反应,特异准确地定位正在凋亡的细胞,因而在光学显微镜下即---察凋亡细胞;由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有dna断裂,植物染色体原位杂交检测服务,因而没有3‘-oh形成,很少能够被染色。本试剂盒适用于组织样本(石蜡包埋、冰冻和超薄切片)和细胞样本(细胞涂片)在单细胞水平上的凋亡原位检测。还可应用于抗肿1瘤药的药1效评价,以及通过双色法确定细胞类型和分化阶段。




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